3.培养基的组成和配制

　　化学合成培养基大致由6种成分组成：（1）糖类（2）多种无机盐类（3）微量元素（4）氨基酸、酰胺、嘌呤（5）维生素（6）生长素.此外,有些培养基还可添加天然的汁液,如椰子汁、酵母提取液、水解酪蛋白、麦芽浸出液等,培养基中如加入0．5～1％的琼脂即为静止培养的固体培养基,否则为悬浮培养的液体培养.不同植物材料常需要改变配方如维持生长和诱导细胞分裂分化的培养基配方就不同,因此配方的种类很多.目前以MS（MurashigeandSkoog）培养基配方为最常用的一种基本培养基,其特点是有利于一般植物组织和细胞的快速生长.

　　4.培养条件

　　温度：对大多数植物组织20～28℃即可满足生长所需,其中26～27℃最适合

　　光：组织培养通常在散射光线下进行.光的影响可导致不同的结果.有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根.有些次生物质的形成,光是决定的因素.

　　渗透压：渗透压对植物组织的生长和分化很有关系.在培养基中添加食盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压.通常1～2个大气压可促进植物组织生长,2个大气压以上时,出现生长障碍,6个大气压时植物组织即无法生存.

　　酸碱度：一般植物组织生长的最适宜pH为5～6．5.在培养过程中pH可发生变化,加进磷酸氢盐或二氢盐,可起稳定作用.

　　通气：悬浮培养中植物组织的旺盛生长必须有良好的通气条件.小量悬浮培养时经常转动或振荡,可起通气和搅拌作用.大量培养中可采用专门的通气和搅拌装置.

　　5.培养材料及处理方法

　　从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料.一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞；被子植物多采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分.

　　材料必须进行灭菌处理.一般用漂白粉溶液（1～10％）、次氯酸钠溶液（0．5～10％）、升汞溶液（0．01％）、乙醇（70％）或过氧化氢（3～10％）等处理后,再用无菌水反复冲洗至净,然后在无菌室内,将所取的组织迅速置入固体培养基.