多大浓度的SDS能使蛋白质变性?最近看到一些DNA提取的资料-查字典问答网

来自田哲夫的问题

　　多大浓度的SDS能使蛋白质变性?最近看到一些DNA提取的资料,上面说在将细胞用TBS悬浮后,加入20%的SDS和蛋白酶K（水解组蛋白）,我们知道SDS是蛋白的变性剂,把它和蛋白酶K同时加入岂不是会使

　　多大浓度的SDS能使蛋白质变性?

　　最近看到一些DNA提取的资料,上面说在将细胞用TBS悬浮后,加入20%的SDS和蛋白酶K（水解组蛋白）,我们知道SDS是蛋白的变性剂,把它和蛋白酶K同时加入岂不是会使蛋白酶K变性嘛?还是20%的SDS浓度不会引起蛋白的变性?亦或是蛋白酶K对变性剂有较强的抗性?

1回答

2020-05-0901:32

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蔡俊杰

　　SDS一般在3~8mmol/l即可使大多数球蛋白变性,20%的SDS浓度可以引起蛋白的变性,但不会引起蛋白酶K的变性.蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶.它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键.此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性.由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶.蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml.在较广的pH范围内（pH4-12.5）均有活性.