如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了质粒-查字典问答网
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  如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题:限制酶BamHⅠBclⅠSau3

  如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了质粒和目的基因中相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题:

  限制酶BamHⅠBclⅠSau3AⅠHindⅢ识别序列及切割位点

  (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具有的基本条件有___(答出两点即可),而作为基因表达载体,除了满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子.

  (2)根据表格分析,经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段___(“可以”或“不可以”)与经HindⅢ酶切后的产物连接,理由是___.

  (3)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用两种限制酶切割,即BelⅠ酶和___.酶切后的载体和目的基因片段,通过___酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于___态的大肠杆菌.

  (4)转入了重组质粒的大肠杆菌可在添加了___的培养基表面长出菌落.若用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中___.

1回答
2020-04-3020:05
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蒋龙潮

  (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存.

  (2)根据表格分析,经BamHⅠ酶切后得到的DNA片段不可以与经HindⅢ酶切后的产物连接,理由是产生的粘性末端不同.

  (3)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamHⅠ可能使质粒中的启动子丢失,因此只能选BelI和HindⅢ两种限制酶切割.酶切后的载体和目的基因片段,通过连接酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于感受态的大肠杆菌.

  (4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,根据质粒上的抗性基因,应在筛选平板培养基中添加四环素.PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链,故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙.

  故答案为:

  (1)具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存

  (2)不可以 产生的粘性末端不同

  (3)HindⅢDNA连接酶 感受

  (4)四环素 引物甲和引物丙

2020-04-30 20:10:27
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