研究人员利用生物工程技术，探究猪bmp15基因在不同组织细胞-查字典问答网

来自林宏杰的问题

　　研究人员利用生物工程技术，探究猪bmp15基因在不同组织细胞中的特异性表达．该工程技术基本流程如图（EGFP基因控制合成增强型绿色荧光蛋白；过程②表示表达载体2成功导入各组织细胞）

　　研究人员利用生物工程技术，探究猪bmp15基因在不同组织细胞中的特异性表达．该工程技术基本流程如图（EGFP基因控制合成增强型绿色荧光蛋白；过程②表示表达载体2成功导入各组织细胞）．请回答：

　　（1）过程①中，需利用___限制酶处理表达载体1．为了大量获得猪bmp基因，可用___技术，该技术需要用到的酶是___．

　　（2）目前对动物细胞培养所需的营养条件还没完全研究清楚，培养受体细胞时往往需要添加___等天然成分．同时还需在培养液中添加一定量的___，以防污染．

　　（3）在实验结果的基础上，提取上述猪肌肉细胞的___（mRNA/DNA），利用标记的EGFP基因作探针，进行分子杂交，可进一步探究猪bmp基因特异性表达的原因．

　　（4）据实验结果推测，猪bmp15基因在___细胞特异性表达．

1回答

2019-08-1106:29

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孙书为

　　（1）据图示可知，切割目的基因时使用的限制酶XhoⅠ和HindⅢ，构建基因表达载体时，需用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，因此过程①中，需利用XhoⅠ和HindⅢ限制酶处理表达载体1．PCR技术可在体外大量扩增目的基因，该技术是在较高温度下进行的，因此需要用到热稳定DNA聚合酶．

　　（2）动物细胞培养时，对动物细胞培养所需的营养条件还没完全研究清楚，因此需要在培养基中加入动物血清；培养受体细胞时，通常需在培养液中添加一定量的抗生素，以防杂菌污染．

　　（3）检测目的基因是否转录出了mRNA，使用分子杂交技术．因此，为了进一步探究猪bmp基因特异性表达的原因，可以提取上述猪肌肉细胞的mRNA利用标记的EGFP基因作探针，进行分子杂交．

　　（4）据实验结果，只有在猪卵巢细胞中检测出绿色荧光，而猪肌肉细胞核猪羊水干细胞中均没有检测出绿色荧光，由此推测猪bmp15基因在猪卵巢细胞中特异性表达．

　　故答案为：

　　（1）XhoI和HindⅢPCR 热稳定DNA聚合酶（Taq）

　　（2）血清、血浆抗生素

　　（3）mRNA

　　（4）猪卵巣细胞