来自黄勤烈的问题
请问westernblot跑胶时积层胶和分离胶需要的电压是多大啊,还有转膜的,电压?我跑的蛋白有14kd到130kd的都有
请问westernblot跑胶时积层胶和分离胶需要的电压是多大啊,还有转膜的,电压?
我跑的蛋白有14kd到130kd的都有
一般浓缩胶为80V,这样可以达到较好的浓缩效果,当条带达到分离胶时,可以调到220V,这样时间快点,做Wb时蛋白降解较少.转膜时一般为100V,转膜时间要根据蛋白大小确定,130kD蛋白分子较大,最好时间长点,不过太长也不好,蛋白转透过膜的,大约要1个半小时吧.
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